试剂在血细胞阐发中的感化
目前国内利用的血细胞阐发仪绝大部门摘用电阻抗法停止细胞计数,其原理是基于细胞在测试系统中产生的脉冲大小与仪器内设定的阈值比力而得出的数据,每个细胞检测时展现的脉冲大小除与细胞自己的大小有关外(如粒细胞者更大,淋巴细胞最小),还与溶血剂的品种、浓度,稀释液的渗入压、离子强度、电导率以及仪器出厂时,仪器内固定的孔电流和脉冲增益等因素有关(见图试剂与白细胞分类的关系). 换言之,上述任一参数的改变,均可招致脉冲的改变,以致细胞计数和分类计数的错误。因而,欲得到准确的成果,原则上应利用原仪器的配套试剂。
试剂与白细胞分类的关系
低温对试剂的影响
对溶血剂的影响:溶血剂次要成分为:外表活性剂、缓冲剂、抗菌剂。因溶血剂中的外表活性剂能与细胞膜感化,毁坏脂量双层构造在细胞膜外表的外表活性剂,操纵流体动力聚集细胞构成由密到疏的外表活性剂层,因为其疏水基团较大为不良导体,加之膜构造松散肿胀从而使粒细胞在阐发仪上的表示体积变大曲至红细胞分裂。假使温度太低,会使溶血剂化解红细胞的才能削弱,使红细胞不克不及完全化解,从而骚乱白细胞的分类计数。
对稀释液的影响:稀释液次要成分为氯化钠、硫酸钠、缓冲剂、抗菌剂等,是具有必然离子强度和电导率的溶液,能稀释血液、庇护血细胞一般形态、构成鞘流,为血细胞计数供给不变的情况。假使温度太低,会影响溶血剂与血细胞的反响。
试剂利用需重视的问题
帝迈生物的稀释液和溶血剂贮存温度为2°C~30°C,有效期为2年。利用适宜温度为15℃~30℃,低于15°C,高于30°C,均对成果有影响,开瓶后利用有效期为60天。
如今正值冬春瓜代之际,国内良多地域特殊是一些北方地域,迟早温度较低,在那种前提下,试剂颠末一晚上存放后会呈现温渡过低以至结冰的现象,而假设在利用前没能很好的复温,有可能会形成白细胞分类反常、以至不分类而招致成果被屏障的现象发作。
如下图为统一样本在差别试剂温度前提下测试成果的差别:
试剂恢复至一般室温(20-25°C)时的测试成果
试剂在低温下存放一夜后未恢复至一般室温
(20-25°C)时的测试成果
从上述图中能够看出,试剂温渡过低,带来最显著的差别表现在白细胞散点图上,散点图蓝色血影部门面积增大,各散点团聚性变差,且散点图中有大量不成团的粒子散布,那间接影响了白细胞的分类和计数。
小结
试剂利用时,必然要包管在规定的温度和有效期内!