到了交配季节，雌蛇常会发出一种特有的气息，那是因为它皮肤和尾基部腺体的排泄物所致。有的气息相当强烈，人亦能闻出来。雄蛇即是依靠灵敏的嗅觉而找到同类的雌蛇的。有的蛇有集群过冬的习气，如许在出蛰时，两性相遇的时机就较多，往往在越冬场合的四周就停止交配，然后才分离活动。
有些蛇在交配前有求偶的表示。那些头部腹面两侧具有疣粒的雄蛇，在求偶时就用疣粒往抚摩雌体，王蛇的雄蛇则用残留的后肢往搔挠雌蛇，引起雌蛇的性感，挠的声音以至在几尺远的处所都能够闻声。浙江短尾峻的雄蛇在发现雌蛇时，就在后面紧逃，频频伸出舌头，往嗅雌蛇的尾基部，而且不断地颤动尾部，一有时机，便冲到雌蛇的背上，或紧挨其一侧。
然后，雌雄两蛇后半身绕在一路，停止交配。那时雌蛇的尾部翘起，猛烈颤动，交配时间仅为2～6分钟。蛇岛的中介蝮在交配前，雄蛇频频点头，向雌蛇头部接近，雌蛇头部微微抬起，并点头，交配约18分钟，之后雄蛇尾手下垂，交接处脱开。
蛇交配时间的长短，区别颇大，一般只要几分钟，但亦有很长的。
成都动物园饲养的黑眉锦蛇，在1965年4月初发作一次交配，从上午8时陆续到下战书7时，交配时间为11小时。我们在1975年5月17日，也看察到蛇笼里的一对黑眉锦蛇在交配，从午后3时半到第二天凌晨4时半才交配完毕，长达13小时之久。其时气温为21～24℃，相对湿度为78％～93％。
交配时，雄蛇尾部摆动不断，发出声音来。交配时间还有更长的，例如红点锦蛇，可长达20小时以上。
雌蛇的交接器为泄殖肛腔，雄蛇的交接器是一对袋状的构造喊做半阴茎，位于尾基内部，袋的内壁上有许多小棘，棘的大小和数量因蛇的品种而有差别，半阴茎的外形亦有种的差别。
交配时，袋的内面向外翻出体外，插进雌体的泄殖肛腔内，停止体内受精，但每次交配只利用一侧的半阴茎。在繁育季节内，一条雄蛇可和几条雌蛇交配，但雌蛇只交配一次，因而，养蛇场里经常让一条雄蛇配上几条雌蛇停止繁育。例如银环蛇大致10条雌蛇配上2～3条雄蛇就够了。
交配后，精子可在雌蛇输卵管内持久保存，一对浙江短尾蝮交配一次，雌蛇持续产仔3年，第一年产仔7条，第二年产仔4条，第三年产仔14条。有的蛇，其精子可在雌体内保存5年之久。